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多肽纯度如何选择

浏览数量:14     作者:本站编辑     发布时间: 2021-01-24      来源:本站

由于不同的实验对多肽纯度的要求各不相同,而且不同纯度在价格上差异很大,所以选择一个合理的纯度要求,是保证实验顺利进行的前提下能把经费利用最大化的重要因素。


粗品肽

粗品肽不推荐用于生物实验。粗肽可能含有大量的非肽类杂质,如残留的有机溶剂、清除剂、TFA和其他不完整肽。其中TFA不能被完全消除(通常交付的肽以TFA盐的形式存在。如果残留的TFA影响您的实验,我们推荐其他盐形式,如醋酸盐和盐酸盐等。这些盐通常比常规TFA盐贵20-30%以上)。这是由于在转化过程中出现更多的肽损失和需要更多的原材料。粗品多肽可应用在大规模功能性筛选。

 

中等纯度

>70%和>75%的多肽可应用在引起动物免疫和制备多克隆抗性血清;通过ELISA操作测定抗体的浓度;>80%,>85%和>90%的多肽可应用在以下领域:非定量酶-底物研究;磷酸化研究;用作Western blotting的非定量研究和免疫组化研究及体外的生物学检测;在亲和层析中结合到色谱树脂上;用作细胞附着培养平板的组织包被;蛋白电泳)。


高纯度 

>95%和>98%的多肽可应用在以下领域:ELISA和RIA标准定量操作;受体/配体相互作用的定量研究;细胞体外生物学检测;细胞体bai研究;定量封闭和竞争性检测;蛋白酶定量研究;酶学研究;色谱标准品;核磁共振研究;单克隆抗体的生产制备。

 

一般根据研究应用的不同,建议分别选用如下级别:

• >70%:肽微阵列,作为制备抗体的抗原,层析法,ELISA测抗血清滴度

• >80%:免疫印迹法(非定量),酶底物肽(非定量),封闭肽(非定量),亲和纯化,磷酸化检测,蛋白电泳,免疫细胞化学

• >95%:标准定量ELISA和RIA,受体配体相互作用(定量),体内、体外 生物学测定,酶的研究和阻断实验(定量),NMR,质谱分析

• >98%:SAR研究,临床试验,APIs,X-ray晶体研究,其他敏感实验,如酶与底物、受体与配体相互作用、阻断和竞争实验。



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